不同培养体系对绵羊颗粒细胞增殖及CYP19基因mRNA表达的影响

为建立更完善的绵羊颗粒细胞体外培养体系,比较不同培养体系下颗粒细胞的增殖与细胞中CYP19基因mRNA的表达水平。绵羊颗粒细胞培养体系分为4个组,即1组(DMEM/F12)、2组(DMEM/F12+10%FBS)、3组(DMEM/F12+10%FBS+Insulin-Transferrin-Selenium-X(ITS))和4组(DMEM/F12+ITS)。结果表明:当绵羊颗粒细胞培养体系中没有血清时(1组和4组),ITS的存在可显著提高CYP19基因mRNA的相对表达量(P<0.05),显著高于有血清培养体系(2组和3组)(P<0.05);随着培养时间的延长,2、3组CYP19基因mRNA的相对表达量明显降低(P<0.01)。结果提示,绵羊颗粒细胞体外培养时,培养基中的血清会显著降低CYP19基因mRNA的表达,在无血清培养体系中增加ITS添加剂则会增加并保持CYP19基因mRNA的表达水平。因此,在进行绵羊颗粒细胞体外功能研究时,采用无血清的培养基,并在其中添加一定量的胰岛素、转铁蛋白制剂是必要的。