HCV-RNA荧光定量标准品制备的探讨

目的探讨丙型肝炎病毒(HCV)RNA定量标准品的制备方法。方法用HCV-RNA阳性扩增目的片段,产物与pGEM-T载体连接并转化感受态大肠杆菌DH5α,经筛选和测序鉴定,阳性质粒体外转录合成cRNA,准确定量后作为标准品。结果 HCV-RNA标准品具有较大的线性范围(109copies/ml-101copies/ml),批内和批间重复性较好,cv分别为2.23%～6.85%和6.10%～10.01%。结论本法制备的HCV-RNA标准品具有较好的检测灵敏度和特异性,适合临床推广应用。