苯妥英钠诱导鼠胚腭突间充质细胞凋亡与Satb2表达变化的关系

目的:探讨苯妥英钠是否能诱导鼠胚腭突间充质细胞凋亡,以及与Satb2基因表达间的关系。方法:取妊娠15 d C57BL/6J鼠胚腭突,原代培养腭突间充质细胞。用细胞免疫荧光鉴定细胞的特性,流式细胞仪检测细胞的纯度和CCK-8法测定苯妥英钠处理细胞的最佳作用浓度和时间;用Annexin-V FITC PI双标法检测细胞早期凋亡情况及用TUNEL法检测细胞晚期凋亡情况;用实时定量PCR及Western blot分析及检测处理后细胞的Satb2的表达变化。结果:原代培养的细胞纯度可达90%左右。与对照组比,苯妥英钠浓度在200μg/mL以下作用24 h可使致死率达50%左右。苯妥英钠可诱导鼠胚腭突间充质细胞显著凋亡。苯妥英钠能显著抑制鼠胚腭突间充质细胞中Satb2 mRNA(下调至58%)和蛋白表达(P<0.01)。结论:苯妥英钠诱导腭裂可能与鼠胚腭突间充质细胞凋亡相关,可能是通过下调细胞中Satb2的表达来实现。