HSP90β在细胞中的表达水平与化疗敏感性的相关研究

Ｃｏｒｒｅｌａｔｉｖｅ Ｓｔｕｄｙ ｏｎ Ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＨＳＰ９０β ａｎｄ Ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ ｏｆ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ

目的了解胃癌细胞ＳＧＣ７９０１及其耐药细胞ＳＧＣ７９０１／ＶＣＲ中ＨＳＰ９０β蛋白的表达，与化疗药物敏感性的关系及降低细胞ＨＳＰ９０β蛋白的表达是否影响化疗药物的敏感性。方法用免疫组化法检测胃癌细胞ＳＧＣ７９０１及其耐药细胞ＳＧＣ７９０１／ＶＣＲ中ＨＳＰ９０β蛋白的表达。ＭＴＴ法测定ＳＧＣ７９０１、ＳＧＣ７９０１／ＶＣＲ细胞及其相应的ＨＳＰ９０β蛋白低表达细胞ＡＨ－ＳＧＣ７９０１和ＡＨ－ＳＧＣ７９０１／ＶＣＲ对化疗药物的敏感性，流式细胞仪测定细胞内药物含量。结果ＳＧＣ７９０１／ＶＣＲ细胞ＨＳＰ９０β蛋白的表达高于ＳＧＣ７９０１细胞。ＳＧＣ７９０１／ＶＣＲ细胞对ＡＤＭ、ＶＣＲ、ＭＭＣ和ＣＴＸ的ＩＣ５０分别为０．３９８、１．２５、０．１９９和３ ９８１．０７μｇ／ｍｌ。ＳＧＣ７９０１对ＡＤＭ、ＶＣＲ、ＭＭＣ及ＣＴＸ的ＩＣ５０分别为１．５８×１０－６、１．９９×１０－３、３．１×１０－２及６３０μｇ／ｍｌ。ＳＧＣ７９０１／ＶＣＲ相对于ＳＧＣ７９０１细胞对ＡＤＭ、ＶＣＲ、ＭＭＣ和ＣＴＸ的耐药指数分别为２．５２×１０５、６．２８×１０２、６．４２和６．３２。

Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｅｖａｌｕａｔｅ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＨＳＰ９０β ｉｎ ＳＧＣ７９０１ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅ ａｎｄ ｉｎ ＳＧＣ７９０１／ＶＣＲ ｏｆ ＭＤＲ－ｔｙｐｅ ｈｕｍａｎ ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅ ａｎｄ ｉｔｓ ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｄｒｕｇ ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｔｕｍｏｒ ｃｅｌｌｓ ａｎｄ ｔｏ ｓｔｕｄｙ ｗｈｅｔｈｅｒ ｄｅｃｒｅａｓｉｎｇ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＨＳＰ９０β ｃｏｕｌｄ ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ ｔｈｅ ｔｕｍｏｒ ｃｅｌｌ ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ ｔｏ ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ａｇｅｎｔｓ． Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ ｍｅｔｈｏｄ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｔｏ ｅｖａｌｕａｔｅ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＨＳＰ９０β ｉｎ ＳＧＣ７９０１ ａｎｄ ＳＧＣ７９０１／ＶＣＲ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅｓ． ＡＨ－ＳＧＣ７９０１ ａｎｄ ＡＨ－ＳＧＣ７９０１／ＶＣＲ ｃｅｌｌｓ ｗｅｒｅ ｔｈｅｉｒ ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ ｌｏｗ ＨＳＰ９０β ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅｓ． ＭＴＴ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｔｏ ｅｖａｌｕａｔｅ ｔｈｅｉｒ ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ ｔｏ Ａｄｒｉａｍｙｃｉｎ ＡＤＲ ｖｉｎｃｒｉｎｓｔｉｎｅ ＶＣＲ ｍｉｔｏｍｙｃｉｎ ＭＭＣ ａｎｄ ｃｙｃｌｏｐｈｏｓ－ｐｈａｍｉｄｅ ＣＴＸ ａｎｄ ｆｌｏｗ ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｔｏ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ ｄｒｕｇ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅｓｅ ｃｅｌｌｓ． Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＨＳＰ９０β ｐｒｏｔｅｉｎ ｉｎ ＳＧＣ７９０１／ＶＣＲ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅ ｗａｓ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｉｎ ＳＧＣ７９０１ ｌｉｎｅｓ． ＩＣ５０ ｏｆ ＳＧＣ７９０１／ＶＣＲ ｃｅｌｌ ｔｏ ＡＤＲ ＶＣＲ ＭＭＣ ａｎｄ ＣＴＸ ｗｅｒｅ ０．３９８ １．２５ ０．１９９９ ａｎｄ ３９８１．０７μｇ／ｍｌ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ ａｎｄ ＩＣ５０ ｏｆ ＳＧＣ７９０１ ｃｅｌｌ ｔｏ ＡＤＲ ＶＣＲ ＭＭＣ ａｎｄ ＣＴＸ ｗｅｒｅ １．５８×１０－６ １．９９×１０－３ ３．１×１０－２ ａｎｄ ６３０ｕｇ／ｍｌ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ． Ｄｒｕｇ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｉｎｄｅｘ ｏｆ ＳＧＣ７９０１／ＶＣＲ ｔｏ ＡＤＲ ＶＣＲ ＭＭＣ ａｎｄ ＣＴＸ ａｓ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ＳＧＣ７９０１ ｗｅｒｅ ２．５２×１０５ ６．２８×１０２ ６．２４ａｎｄ ６．３２ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ ａｎｄ ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ＡＨ－ＳＧＣ７９０１ ａｎｄ ＡＨ－ＳＧＣ７９０１／ＶＣＲ ｃｅｌｌｓ ｔｏ ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｄｒｕｇｓ ｗａｓ ｍｕｃｈ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ． Ｔｈｅ ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ＡＨ－ＳＧＣ７９０１ ｔｏ ＡＤＲ ＶＣＲ ａｎｄ ＭＭＣ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ １０１００００ ａｎｄ ２４．８ ｔｉｍｅｓ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ ａｓ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｉｔｓ ｐａｒｅｎｔ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅｓ ａｎｄ ｉｔｓ ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ ｔｏ ＣＴＸ ｈａｄ ｎｏ ｏｂｖｉｏｕｓ ｃｈａｎｇｅ． Ｔｈｅ ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ＡＨ－ＳＧＣ７９０１／ＶＣＲ ｔｏ ＡＤＲＶＣＲＭＭＣ ａｎｄ ＣＴＸ ｉｎｃｒｅｓｅｄ ３．９８ ６．２８ ３．１５ ａｎｄ ５．０１ ｔｉｍｅｓ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ ａｓ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｉｔｓ ｐａｒｅｎｔ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅ． Ｔｈｅ ｍｅａｎ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｉｎｔｅｎｓｉｔｙ ｏｆ ＡＤＲ ｉｎ ＡＨ－ＳＧＣ７９０１ ａｎｄ ＡＨ－ＳＧＣ７９０１／ＶＣＲ ｃｅｌｌ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ Ｐ＜ ０．０５． Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＨＳＰ９０β ｐｒｏｔｅｉｎ ｉｎ ＳＧＣ７９０１／ＶＣＲ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅ ｗａｓ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｉｎ ＳＧＣ７９０１ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅｓ． Ｔｈｅ ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ＡＨ－ＳＧＣ７９０１ ａｎｄ ＡＨ－ＳＧＣ７９０１／ＶＣＲ ｃｅｌｌｓ ｔｏ ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｄｒｕｇｓ ｗａｓ ｍｕｃｈ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ａｎｄ ｔｈｅ ｄｒｕｇ ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ＡＨ－ＳＧＣ７９０１ ｃｅｌｌ ｗａｓ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｍｏｒｅ ｏｂｖｉｏｕｓｌｙ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｏｆ ＡＨ－ＳＧＣ７９０１／ＶＣＲ ｃｅｌｌ．