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p53基因在亚砷酸钠致人胚胎肺成纤维细胞凋亡中的作用

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摘要 目的探讨p53、Bax、bcl-2基因在亚砷酸钠(NaAsO2)致人胚胎肺成纤维细胞(HELF)凋亡中的作用。方法分别取转染了p53质粒HELF细胞(p53组)、转染了PC质粒的HELF细胞(PC组)、常规培养的HELF细胞(正常组),在6孔板中培养48h后,分别加入0、3、9、15mmoL/LNaAsO2溶液,培养24h后,用real-timePCR法检测p53、Bax、bcl.2mRNA基因表达水平。采用免疫组织化学SABC法检测p53、Bax、bcl-2基因蛋13表达水平;用流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果p53组细胞p53基因mRNA表达水平(0.51±0.29)低于Pc组及正常组[(1.32±0.26),(1.00±0.20),P均〈0.05],p53组p53基因蛋白表达水平[(4.10±1.20)%】低于Pc组和正常组[(8.00±1.63)%、(7.90士1.79)%,P均〈0.05]:p53组、Pc组、正常组在染砷0、3、9、15mmol/L时,细胞凋亡率[(0.57±0.28)0/0、(22.91±4.86批、(40.05±3.93溉、(44.87±3.58)%,(0.65±0.24)%、(14.09土3.49)%、(20.31±3.66)%、(32.42±3.63)%,(0.56±0.25)%、(12.14±3.70)%、(19.61±3.63)%、(30.43±2.83)%]、BaxmRNA表达水平[(12.73土3.96)、(25.12士6.42)、(104.96±26.77)、(154.04±3052),(14.63±3.57)、(36.75±3.67)、(272.26±66.11)、(846.12±243.36),(14.75±5.65)、(37.22±11.27)、(278.51±37.42)、(861.67±369.29)]、Bax蛋白表达水平[(15.07±0.83)%、(23.79±3.99)%、(3851±158)%、(53.86±124)%,(15.43±1.45)%、(36.11±1.37)%、(56.86±1.97)%、(76.09±2.01)%,(15.20士1.03)%、(35.25±1.09)%、(55.56±2.17)%、(74.48±2.85)%]均随着染毒剂量的增加而增高(P均〈0.05),而bcl.2mRNA表达水平[(443.00±244.47)、(156.79士53.18)、(62.13±13.66)、(23.10±6.44),(420.55.4.110.77)、(48.15士10.02)、(14.91±6.53)、(7.54±2.62),(577.75±123.22)、(49.68±10.11)、(12.41±1.28)、(7.22±1.89)]、bcl-2蛋白表达水平[(47.20±3.77)%、(41.80±2.94)%、(36.00士2.36)%、(29.00±2.91)%,(45.90士4.15)%、(35.70±2.77)%、(29.80±2.78)%、(24.80±2.66)%,(46.70士3.47)%、(36.20±2.90)%、(30.10士3.21)%、(25.10±2.28)%]均随着染毒剂量的增加而降低(P均〈O.05);在染砷3、9、15mmol/L时,p53组的细胞凋亡率、bcl.2mRNA表达水平、bcl-2蛋白表达水平均高于同-染砷剂量的正常组和PC组(P均〈0.05),而BaxmRNA表达水平、Bax基因蛋白表达水平均低于同-染砷剂量的正常组和Pc组(P均〈0.05)。结论p53基因减少了NaAsO:致HELF的凋亡。可能是通过改变部分凋亡途径实现。
出处 《遵义科技》 2013年第3期47-51,共5页
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