蝴蝶兰叶片离体培养胚胎组织的发生

以蝴蝶兰试管苗叶片为外植体,以1/3MS为基本培养基,研究了不同浓度6-苄基腺嘌呤(6-BA),腺嘌呤(Ad),萘乙酸(NAA)及其组合对胚胎组织发生的影响。同时也研究了添加不同浓度椰汁对胚胎组织形成的影响。结果表明:6-BA对胚胎组织的诱导效果较AD好,NAA与二者配合使用可提高胚胎组织的发生率,其最佳浓度组合为6-BA2.0 mg·L-1+Ad2.0 mg·L-1+NAA0.4 mg·L-1。椰汁200-300mL·L-1有利于胚胎组织的形成。其胚胎组织的组织学观察表明:胚胎组织起源于叶片上表皮气孔附近单细胞的一些叶肉细胞,外源基因转入的最佳时期是多细胞球形胚时期。