一种快速筛选基因转染阳性细胞的标志基因-GFP

目的 :寻求基因转移中快速检测转染阳性细胞的方法。方法 :采用逆转录病毒介导的基因方法 ,将Ⅰ型单纯疱疹病毒胸苷激酶 (HSV -TK)基因、绿色荧光蛋白 (GFP)基因及抗新霉素 (NeoR)基因插入人外周血单个核细胞 (PBMNC) ,利用GFP在细胞内的表达所产生的绿色荧光 ,经流式细胞仪测定基因转移效率。结果 :被转染细胞以T淋巴细胞为主 ,占 11.39% ,而且被转化的T细胞中CD4 阳性细胞转化率较高 ,占 7.6 1% ,CD8,CD19和CD33 阳性细胞转化率分别为 2 .9% ,2 .1%和 4.72 %。PCR鉴定表明转染的人外周血单个核细胞中含有NeoR基因。结论 :在基因转移中GFP可以为一种标记基因 。