犬瘟热病毒N、F蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备

为了制备犬瘟热病毒N蛋白、F蛋白的多克隆抗体,试验将犬瘟热病毒N基因、F基因的PCR扩增产物与原核表达载体pET-32a(+)连接,转化大肠杆菌Rostte(DE3),经IPTG诱导蛋白表达,将表达的蛋白纯化,免疫SPF级KM小鼠制备抗体,通过间接ELISA法测定抗体效价,Western-blot检测其反应原性。结果表明:犬瘟热病毒N蛋白、F蛋白在大肠杆菌中高效表达,制备的抗体效价高达1×105,且能特异性识别犬瘟热病毒的N蛋白、F蛋白。