流感病毒在MDCK细胞中培养的条件优化

目的探讨流感病毒在MDCK细胞中的最佳培养条件。方法将流感病毒以吸附法和直接接种法接种在MDCK细胞上,比较接种效果;选择最佳病毒接种方案,分别通过调整细胞培养时间、培养温度、病毒生长液胎牛血清浓度、胰酶浓度、病毒接种量和染毒传代次数来优化选择最佳培养条件。结果直接接种法的培养效率较高;流感病毒在MDCK细胞中培养的最佳收获时间为96h;最佳培养温度为35.5℃;胎牛血清对病毒的增殖有明显的抑制作用;病毒生长液含有终浓度为2.5μg/mL的胰酶可提高病毒血凝效价;用于流感病毒培养的MDCK细胞的传代次数不宜超过4代。结论流感病毒在MDCK细胞中最佳培养条件是:在病毒生长液环境下直接接种流感病毒,放置35.5℃、5%CO2培养箱培养96h后收获。其中病毒生长液中无胎牛血清、胰酶终浓度为2.5μg/mL。