RP-HPLC法同时测定不同产地金银花中木犀草苷和6种有机酸

Simultaneous determination of galuteolin,and six organic acids in Lonicerae Japonicae Flos from different habitats by RP-HPLC

目的建立反相高效液相色谱法测定不同产地金银花中木犀草苷、绿原酸、隐绿原酸、新绿原酸和异绿原酸A、B、C的方法。方法PhenomenexODSC】。色谱柱（4．6mm×250mm，5μm），以乙腈（A）-0．4％磷酸（B）为流动相，梯度洗脱（0～10rain，5％→9％A；10—30min，9％A；30—60min，9％-30％A；60—80min，30％A），体积流量1．0mL／min，最大吸收波长下检测（木犀草苷在350iqtm，隐绿原酸、绿原酸和新绿原酸在327am，异绿原酸A、B、C在330nm）。结果7种待测成分分离度良好；各成分质量浓度与峰面积在测定范围内均呈良好线性关系（r≥0．9990），木犀草苷、绿原酸、隐绿原酸、新绿原酸和异绿原酸A、B、C的平均回收率（RSD）分别为99．52％（2．56％）、97．93％（2．19％）、96．12％（1．19％）、102．50％（1．63％）、97．57％（1．60％）、97．12％（2．64％）、100．32％（2．89％）。结论该方法简便、准确、重复性好，可用于金银花的质量控制。

ABSTRACT： AIM To establish a RP- HPLC method for simultaneously determining the levels of galuteolin, ehlorogenic acid, cryptochlorogenic acid, neochlorogenic acid, isochlorogenie acid A, B, and C in Lonicerae Ja- ponicae Flos from different habitats. METHODS A Phenomenex ODS Cls column （ 4.6 mm×250mm, 5 μm） was used with the mobile phase consisting of aeetonitrile （A） -0.4% phosphoric acid （B） in gradient elution mode （0-10 min, 5%A-＋9%A; 10-30 min, 9%A; 30 -60 min, 9%A--~30%A; 60 -80 rain, 30%A）, at the flow rate of 1.0 mL/min. The UV detection wavelength was set at the maximum absorption wavelength, 350 nm for galuteolin, 327 nm for ehlorogenic acid, cryptochlorogenic acid and neochlorogenic acid, 330 nm for isoeh- lorogenic acid A, B, and C. RESULTS Excellent chromatographic separation was achieved with good line arity （r≥0. 999 0） within the studied concerntration ranges. The average recovery rates （RSD） of galuteolin, chloro- genic acid, eryptochlorogenic acid, neoehlorogenic acid, isochlorogenic acid A, B, and C were 99.52% （2.56%）, 97.93% （2.19%）, 96.12% （1.19%）, 102.50% （1.63%）, 97.57% （1.60%）, 97.12% （2. 64% ） , 100.32% （2. 89% ）, respectively. CONCLUSION The method is simple, accurate and reproducible. It can be used for the quality control of Lonicerae Japonicae Flos.