宫颈脱落细胞母胎RASSF1A基因甲基化差异表达

目的 探讨胎儿特异性的超甲基化的Ras相关区域家族1A（RASSF1A）基因在妊娠早期无创性产前诊断中的价值. 方法 2011年11月18日至2012年6月15日,选择在安徽医科大学第一附属医院妇产科行清宫术的妊娠早期胎停育妇女81例,行输卵管通液或宫颈息肉摘除的正常未孕妇女8例,用宫颈细胞刷刷取宫颈脱落细胞,制备单细胞悬液;同时留取胎停育孕妇的绒毛、蜕膜组织.绒毛组织行G显带核型分析.采用甲基化敏感性限制性内切酶联合荧光定量-聚合酶链反应技术检测宫颈脱落细胞、绒毛和蜕膜组织RASSF1A基因的甲基化水平,采用方差分析和t检验比较组间差异. 结果 81例胎停育孕妇宫颈脱落细胞悬液经HE染色后有67例可见胎儿滋养细胞,绒毛染色体核型分析显示3号染色体数目增加者8例,作为核型异常组;绒毛染色体核型分析正常者37例,作为核型正常组;其他异常的22例剔除研究（因RASSF1A基因位于3号染色体）.核型异常组和核型正常组RASSF1A基因甲基化指数分别为0.023 3±0.007 7和0.020 6±0.006 7,均高于正常未孕妇女（0.012 1±0.008 2）（t值分别为2.643和2.565,P均＜0.05）.胎停育孕妇蜕膜组织和正常未孕妇女的宫颈脱落细胞均为纯母体组织,RASSF1A基因甲基化指数差异无统计学意义（0.015 3±0.005 4与0.012 1±0.008 2,t=1.448,P＞0.05）.37例胎儿核型正常者中有10例体外受精-胚胎移植病例,绒毛组织RASSF1A基因甲基化指数为0.805 9±0.008 1,与另27例自然受孕者差异无统计学意义（0.791 3±0.092 8,t=1.103,P＞0.05）. 结论 RASSF1A基因在母体低甲基化状态,在胎儿高甲基化,妊娠早期宫颈脱落细胞中因含胎儿细胞而使甲基化水平增加,为无创性产前诊断胎儿染色体数目异常提供了重要线索.