RNAi沉默ERK1/2基因表达对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响

目的:探讨RNA干扰细胞外信号调节激酶1/2(extracellular signal-regulated kinase 1/2,ERK1/2)基因表达对大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖的影响。方法 :利用脂质体将ERK1/2 siRNA片段转染入VSMCs,实时荧光定量RT-PCR检测ERK1/2 mRNA表达水平,Western blotting法检测各组ERK1/2蛋白表达量的变化,MTS法检测细胞的增殖情况。结果:RT-qPCR结果显示,干预组的ERK1 mRNA表达量明显下降,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);干预组的ERK2 mRNA表达量明显下降,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。Western blotting结果显示,干预组的ERK1/2蛋白表达相对量明显下降,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。转染24 h、48 h、72 h后,MTS结果显示,干预组细胞的增殖受抑制,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:针对ERK1/2的特异性siRNA能够有效抑制血管平滑肌细胞中的ERK1/2基因表达,并抑制血管平滑肌细胞的增殖。ERK1/2基因被沉默后,对血管平滑肌细胞的增殖有抑制作用,提示RNAi技术沉默ERK1/2可以作为动脉粥样硬化及血管成形术术后再狭窄防治新的研究方向。