RP-HPLC法同时测定壮骨止痛颗粒中淫羊藿苷、延胡索乙素和蛇床子素的含量

Simultaneous determination of icariin,tetrahydropalmatine and osthole in Zhuanggu Zhitong granules by RP-HPLC

目的：采用HPLC法同时测定壮骨止痛颗粒（淫羊藿、蛇床子、延胡索）中的淫羊藿苷、延胡索乙素和蛇床子素的含量。方法：采用SymmetryC18（150mm×3．9mm，5μm）色谱柱，以乙腈（A）-0．1％磷酸溶液（B；三乙胺调pH至6．5）为流动相，梯度洗脱（0～24min，24．5％A；24—70min，24．5％A-57．5％A），流速0．8mL·min^-1，柱温35℃，检测波长270nm（0～25min）、282nm（25-55min）、322nm（55～70min），进样量20μL。结果：淫羊藿苷、延胡索乙素和蛇床子素的线性范围分别为0．255．0．561mg·mL^-1（r=0．9996）、6．40～14．08μg·mL^-1（r=0．9998）、0．170—0．510mg·mL^-1（r=0．9999）；—平均加样回收率（n=6）分别为99．19％（RSD=1．2％）、99．97％（RSD=0．89％）、99．71％（RSD=1．2％）。结论：本方法方法学验证可用于壮骨止痛颗粒的质量控制。

Objective： To simultaneously determine the contents of icariin, tetrahydropalmatine and osthole in Zhuanggu Zhitong granules. Methods： RP - HPLC method was used. The determination was performed on a Sym- metry C18 column （150 mm x3.9 mm,5 μm）with mobile phase consisting of acetonitrile（A） -0. 1% phosphoric acid （ B ; adjusted pH to 6.5 with triethylamine） in gradient elution （0 - 24 min,24. 5 % A ; 24 - 70 min, 24. 5 % A→57.5% A）. The flow rate was 0. 8 mL · min-1. The column temperature was 35 ℃. The detection wavelength was set at 270 nm in 0 - 25 min,282 nm in 25 - 55 min, and 322 nm in 55 - 70 rain. Injection volume was 20 μL. Results： The linear ranges of icariin, tetrahydropalmatine and osthole were 0. 255 - 0. 561 mg · mL-1 （ r = 0. 9996） ,6. 40 - 14.08 μg · mL-1 （ r = 0. 9998） and 0. 170 - 0. 510 mg · mL-1 （ r = 0. 9999 ）, respectively. The average recoveries（n =6） were 99. 19% （RSD = 1.2%）,99.97% （RSD =0.89%） and 99.71% （RSD = 1.2% ） , respectively. Conclusion： The method can be used for the quality control of Zhuanggu Zhitong granules by methodology validation.