用异羟基洋地黄毒甙配基(Digoxigenin)标记cDNA-RNA杂交试验检测登革热病毒的研究

本文用一种新的非同位素标记物异羟基洋地黄毒甙配基(Digoxigenin)通过随机寡核苷酸引物法(RHP)及缺口平移法Biotin标记制成Dig-Den.V-PDW79cDNA探针和Biotin-PDW79-cDNA探针。将已知含量的提纯的Den.V-RNA点NC膜上,分别用Dig探针及Biotin探针与其杂交,Dig探针能测出最小量0.1pg,而Biotin探针仅为10pg。斑点杂交试验结果显示,Dig探针杂交阳性信号明显比Biotin探针强。因此,Dig探针不仅敏感,而且特异并能快速检出登革热病毒和鉴定其型别。