韩国2型猪繁殖与呼吸综合征病毒NSP2缺失株的全基因组序列分析及致病特性研究

猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)是一种全球范围内广泛分布的猪病病毒,且不同毒株间表现为遗传和致病性的多样性。本试验主要进行了CA-2和KNU-12-KJ42个韩国2型PRRSV非结构蛋白(NSP2)缺失株的全基因组序列测定和致病性研究。CA-2和KNU-12-KJ4的全基因组长度分别为15018和15019bp,不含有poly(A)尾巴,由于NSP2基因内大片段缺失的存在,其分别比2型NA原型株VR-2332少393和392bp。CA-2和KNU-12-KJ4的全基因组序列均含有1个189或190bp的5′UTR、1个14677bp的蛋白编码区及1个151bp的3′UTR。全基因组同源性比对分析结果显示CA-2和KNU-12-KJ4的核苷酸序列之间同源性最高(变异度为10.7%),其次分别是韩国株CA-1(变异度为11.3%)和美国株MN184C(变异度为13.1%)。为了评价NSP2缺失株的体外免疫活性,作者运用荧光定量RT-PCR探讨分别感染CA-2和KNU-12-KJ4艳摘译丁凡超校的PAM-pCD163细胞中免疫炎性因子和趋化因子表达的变化。结果显示,NSP2缺失病毒感染的PAM-pCD163细胞中的细胞因子IL-8、IL-10、TNF-α及趋化因子MCP-1、RANTES表达水平均显著升高;而干扰素IFN-β、IFN-γ、IFN-λ和ISG-15、ISG-54、ISG-56抗病毒基因含量未发生变化或表达下降。动物致病性试验结果显示,CA-2和KNU-12-KJ4感染猪的体重明显降低。另外,NSP2缺失株在猪体内被很好复制,具有显著增加且持续的病毒血症。综上所述,本试验结果表明CA-2和KNU-12-KJ4体、内外感染结果是可比的,提示大片段的NSP2缺失可能是导致PRRSV致病性的一个主要遗传决定因子。