小鼠颌下腺中Bmi-1基因作用的研究

The role of Bmi-1 gene in submandibular gland of mice

目的 观察Bmi-1基因对小鼠颌下腺形态与功能的影响,以期研究Bmi-1基因对小鼠颌下腺的增殖与衰老的作用.方法 利用组织学、组织化学及蛋白质印迹法比较分析4周龄12只雄性野生型小鼠（WT）和12只雄性Bmi-1基因敲除小鼠（Bmi-1-/-）颌下腺的重量、唾液分泌、形态、衰老与增殖能力等方面的表型差异.结果 颌下腺重量/体质量比WT小鼠[（1.89±0.15）μg]与Bmi-1-/-[（1.34±0.07） μg]比较,差异有统计学意义（P=0.003）;单位体质量静态唾液总流率WT[（0.21±0.02） μg/rnin]及Bmi-1-/-[（0.10±0.02） μg/min]比较,Bmi-1-/-明显降低,差异有统计学意义（P=0.001）;Bmi-1-/-颌下腺导管增多、颗粒曲管较明显、管径细、分支少;衰老相关的β-gal染色阳性细胞数增加（WT：0.00,Bmi-1-/-：0.18 ±0.02）;此外,细胞增殖相关指标Ki-67阳性细胞百分率降低（WT：0.40 ～0.47,Bmi-1-/-：0.18 ～0.20）（P=0.000）;蛋白质印迹法显示细胞周期蛋白p16（WT：1.00±0.12,Bmi-1-/-：0.00 ±0.00）（P =0.003）、蛋白质印迹方法p19（WT：0.97 ±0.09,Bmi-1-/-：5.09±0.21）（P=0.004）表达水平升高.结论 Bmi-1基因缺失可导致小鼠颌下腺呈衰老表型,功能异常.

Objective To determine the role of Bmi-1 in the submandibular gland （SMG） of mice.Methods SMG of 4-week wild-type（WT） and Bmi-1 null（Bmi-1-/-） mice was analyzed on the weight,salivary flow rate,hematoxylin-eosin staining morphological differences and the changes in proliferation and aging by histology,immunohistochemistry and Western blotting.Results Compared with WT mice,the average static salivary flow rate [WT：（0.21 ±0.02） μg/min,Bmi-1-/-：（0.10 ±0.02） μg/min] （P =0.001） and the submandibular gland weight [WT：（1.89 ± 0.15） μg],Bmi-1-/-：[（1.34 ± 0.07） μg] （P =0.003） of the male Bmi-1-/-mice were significantly decreased,the number of gland duct increased,and the granular convoluted duct showed reduced diameter and branches.More senescence-associated β-galactosidase positive cells existed in SMG of Bmi-1-/-mice （WT：0.00,Bmi-1-/-：0.18 ± 0.02）,and Ki-67 immunopositive cells decreased in SMG of Bmi-1-/-mice（WT：0.40 ～ 0.47,Bmi-1-/-：0.18 ～ 0.20） （P =0.000）.The expression of p16 （WT：1.00 ± 0.12,Bmi-1-/-：0.00 ±0.00） （P =0.003） and p19（WT：0.97 ±0.09,Bmi-1-/-：5.09 ±0.21） （P =0.004） were up-regulated dramatically in SMG of the Bmi-1-/-mice.Conclusions Bmi-1 gene deficiency causes abnormal function of SMG by inducing senescence phenotype of SMG.