硫酸镍对原代培养大鼠睾丸间质细胞DNA氧化损伤的研究

目的探讨硫酸镍(NiSO4)致原代培养大鼠睾丸间质细胞DNA氧化损伤的作用。方法选择健康成年雄性Wistar大鼠,采用胶原酶消化以及Percoll分离液梯度密度离心法,经贴壁培养获得高纯度大鼠睾丸间质细胞,采用3β-HSD法鉴定细胞纯度。取对数生长期的间质细胞,分别用浓度为0、250、500和1000μmol/L硫酸镍处理6、12和24 h。采用流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS)水平;分光光度法检测间质细胞抑制羟自由基能力(Anti-OH·),酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞内8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)含量。结果经3β-HSD法鉴定,睾丸间质细胞纯度达95%以上。与对照组比较,250μmol/L硫酸镍处理12 h组和500、1000μmol/L硫酸镍各处理组,ROS水平均增高(P<0.05);250μmol/L硫酸镍处理12和24 h组,以及500、1000μmol/L硫酸镍各处理组,Anti-OH·均降低(P<0.05);500、1000μmol/L硫酸镍处理12和24 h组,8-OHdG含量均增加(P<0.05)。结论硫酸镍致大鼠睾丸间质细胞DNA氧化损伤可能与其导致间质细胞Anti-OH·降低和ROS水平增加有关。