高效液相色谱法测定叶酸片的含量与有关物质

目的 建立测定叶酸片含量及有关物质的高效液相色谱（HPLC）法.方法 采用 Hypersil C18（4.6 mm×250 mm,5 μm）色谱柱,流动相磷酸盐缓冲液（磷酸二氢钾6.8 g与0.1 mol·L-1氢氧化钾溶液70 mL,加水稀释至800 mL,调节pH至6.3,加甲醇80 mL,用水稀释成1 000 mL为流动相）,检测波长254 nm.结果 叶酸在19.80～277.24 μg·mL-1浓度范围内,峰面积与浓度呈良好线性关系（r＝0.999 9,n＝7）,平均回收率98.65%～98.95%,RSD＝0.20%～0.60% （n＝9）.叶酸及其有关物质得到基线分离,方法最低检测限0.6 ng,控制总杂质量不得超过2.0%.结论 该方法测定叶酸片的含量及有关物质,方法简便、快速、结果准确,专属性好,适用于叶酸片及其制剂的质量控制.