猪卵子体外受精方法研究

本试验分别研究了:(1)猪卵子体外成熟所需要的培养时间;(2)促性腺激素和猪卵泡液对猪卵子体外成熟的作用;(3)不同体外受精次数对猪卵子体外受精率的影响;(4)不同精子获能辅助剂对猪精子体外获能的作用;(5)不同种类猪精液的体外受精能力.研究结果表明,猪卵子体外成熟所需培养时间是32～36小时,在体外成熟培养液中加入0.25IU/ml PMSG(或FSH)和10%猪卵泡液可以促进猪卵子体外成熟,在精子体外获能培养液中加入0.05mg/ml肝素,在体外受精培养液中加入2mg/ml咖啡因可以促进猪精子休外获能并可提高体外受精率,体外成熟后的猪卵子进行2次受精可以获得较高的体外受精率.本试验用新鲜射出精子,冷冻射出精子,新鲜附睾精子,冷冻附睾精子对体外成熟猪卵子进行体外受精,受精后卵裂率(2～4细胞期)分别是24.26%,23.40%,22.65%和24.24%.