抗肝癌大鼠单克隆抗体3A5的特性及其平阳霉素偶联物的抗肿瘤活性

以人肝癌BEL－7402细胞免疫LOU／C大鼠，取其脾细胞与大鼠IR983F骨髓瘤细胞融合，获得稳定分泌抗人肝癌单克隆抗体3A5杂交瘤细胞株。ELISA交叉反应检测3A5对人肝癌BEL－7402、7721和Q3细胞皆呈强阳性，对人胚肺2BS细胞、人口腔鳞癌KB细胞和小鼠正常肝细胞等呈阴性。免疫电镜研究显示，肝癌细胞对单抗3A5胶体金粒的内化为44％，而B细胞为185，平均每个肝癌细胞含有金颗粒族数为0．89，KB细胞为0．22，相差4倍，肝癌细胞对胶体金颗粒的内化能被预先加入的单抗3A5特异性地封闭，将单抗3A5与平阳霉不进行偶联，用克隆生成法观察偶联物和游离平阳霉素对肿瘤细胞的杀伤作用，当药物与细胞接触为1小时，单抗3A5与平阳霉素偶联物对肝癌细胞有选择性杀伤作用，按IC50比较，偶联物对靶细胞肝癌细胞的杀伤作用（IC50＝0．0075μgmol/L)比对非靶细胞KB细胞的作用（IC50＝0．70μmol/L）约强100倍，偶联物对靶细胞的作用比游离平阳霉素（IC50＝0．31μmol/L)约强50倍。