摘要
本文通过逆转录(RT)-聚合酶链式反应(PCR)从一份来自甘肃武威地区献血员HCV阳性血中扩增并克隆到573bp的HCV核心基因全自段,用T-A克隆载体法将此片段接入克隆载体pUC19中,进行核苷酸序列测定后发现,武威地区分离株与HCV I型株HCV-I和HCV-II型株HCV-Hebei在该基因区段的核苷酸/氨基酸序列同源性分别为89.6%/95.4%和97.3%/97.4%。利用原核高效表达载体pTrCHisA在大肠杆菌中有效地表达了带有6个组氨酸的C区融合蛋白,通过中和抑制ELISA和Western-blot对占菌体总蛋白15%以上的表达产物进行了鉴定,有Probond resin column对表达产物进行了亲和层析纯化,纯化产物用于检测HCV阴阳性血清标本,初步表明该抗原有很好的免疫反应性和特异性,与日本东燃公司C11抗原活性和特异性基本一致。