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哇巴因多克隆抗体F(ab)_2片段的制备及其分子量测定 被引量:2

Preparation and molecular weight estimation of ouabain polyclonal antibody F(ab)_2 fragment
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摘要 目的制备哇巴因多克隆抗体F(ab) 2 片段 ,并对其进行分子量的测定。方法免疫家兔制备哇巴因多克隆抗体 ,在适宜的条件下 ,用胃蛋白酶酶解哇巴因多克隆抗体 ,制备F(ab) 2 片段。酶解产物经HPSEC分析、纯化 ,ELISA法检测其免疫学活性。并在适宜的色谱条件下 ,分别测定三种标准蛋白的洗脱体积 ,绘制标准曲线 ,测定其分子量。结果 10 0mg哇巴因多克隆抗体在 2mg胃蛋白酶消化 18h ,反应体系pH 3 .0的条件下消化 ,制备出了活性的F(ab) 2 片段 ,其相对分子质量为 10 7kD。结论用胃蛋白酶消化哇巴因多克隆抗体 ,可制备出活性的F(ab) 2 片段 ,同时其相对分子质量的测定为其进一步研究提供了依据。 PurposeThe aim is to prepare ouabain polyclonal antibody F(ab) 2 fragment and to estimate its molecular weight.MethodsOuabain polyclonal antibody was obtained from immunized rabbits.The antibody was digested with pepsin.The resulting products were analyzed and the molecular weight of F(ab) 2 fragment was estimated by HPSEC.The immune activity was detected by ELISA.Results100 mg of ouabain polyclonal antibody was digested by 2 mg of pepsin for 18 hours at pH 3.0 and active ouabain polyclonal antibody F(ab) 2 framgment was obtained.Its molecular weight was 107 kD.ConclusionThe active ouabain polyclonal antibody F(ab) 2 fragment could be prepared by digesting its antibody with pepsin.
出处 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 2001年第1期5-7,共3页 Chinese Journal of Biochemical Pharmaceutics
基金 国家科技部医药技术创新博士项目!(98 B 0 7)
关键词 哇巴因 抗体 F(AB)2片段 制备 相对分子量 Ouabain Antibody F(ab) 2 fragment Preparation Molecular weight
  • 相关文献

参考文献5

二级参考文献3

  • 1李成文,现代免疫化学技术,1992年
  • 2余芒,上海免疫学杂志,1986年,6卷,1页
  • 3冯长顺,中华内科杂志,1996年,35卷,763页

共引文献46

同被引文献39

引证文献2

二级引证文献8

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