GABA/孕酮激发豚鼠精子聚磷酸肌醇降解及其在顶体反应中的作用

为了研究ＧＡＢＡ／孕酮（Ｐ４）激发精子聚磷酸肌醇（ＰＰＩ）降解及其在顶体反应（ＡＲ）中的作用，将豚鼠精子在ＭＣＭ培养基获能培养５．５ｈ，３２Ｐ－标记精子１ｈ，经Ｐｅｒｃｏｌｌ密度梯度离心洗涤，然后以ＡＲ刺激剂激发精子ＡＲ，并对精子膜脂进行提取、分离和鉴定，同时，以相差显微镜评价精子ＡＲ％．结果为：（ｉ）ＧＡＢＡ刺激二磷酸磷脂酰肌醇（ＰＩＰ２）和一磷酸磷脂酰肌醇（ＰＩＰ）迅速降解，而磷脂酸（ＰＡ）增加；在５ｍｉｎ时ＰＩＰ２和ＰＩＰ明显下降，１０ ｍｉｎ几近完成，而ＡＲ明显滞后，１５ｍｉｎ才达到峰值；（ｉｉ）Ａ２３１８７， Ｐ４和ＧＡＢＡ均可激发ＰＰＩ降解和ＡＲ增加，其能力依次为Ａ２３１８７≥ＧＡＢＡ；（ｉｉｉ）新霉素可明显地抑制Ｃａ２＋／ＧＡＢＡ或Ｐ４及Ａ２３１８７刺激ＰＩＰ２和ＰＩＰ降解、ＰＡ产生和ＡＲ增加；（ ）ＰＰＩ降解需Ｃａ２＋参与．当ＥＧＴＡ或Ｃａ２＋通道阻滞剂（Ｌａ３＋）存在时，ＰＩＰ２和ＰＩＰ降解，ＰＡ产生和ＡＲ升高均被明显抑制．上述结果表明，天然激动剂ＧＡＢＡ或Ｐ４刺激豚鼠精子膜ＰＰＩ降解是引起ＡＲ的基础，该作用是通过Ｃａ２＋介导、激活膜磷脂酰肌醇特异磷脂酶Ｃ（ＰＩＣ）而完成的．