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鼠体突变型p53外源基因的垂直传递和转位观察

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摘要 外源基因用于制作转基因鼠并能成功地传递到子代已是不争的事实。但是,有关研究转基因的大小以及对其功能的影响却鲜见报导。本实验对体突变型p53基因-作为外源基因在172^Arg-Leu-体突变型p53基因的双转基因鼠家系中的遗传行为进行了研究。以体突变型p53基因的XhoI-ApaLI片段为探针,对雌性双转基因鼠#4491及其子代进行Southern blot分析(Fig.2)。通过Betagen Meter测定,比较杂交膜上探针的吸附量得知:子鼠#5074等体内的外源p53基因的拷贝数是其亲本34491的3倍。Fig.1为#4491与雄性FVB鼠杂交后代的家系谱。杂交F1的子代中,那些外源p53基因拷贝数是其亲代(F1)3倍的鼠(如#5071和#668)、其后代中继续出现这种基因拷贝数的变化。取待测鼠#5074的脾细胞制备染色体,经G染色,以WAP-双转基因-SV40连结p(A)的结构为探针,进行原位荧光测定。Fig.3表明:b所指的外源p53基因从所在的染色体上发生跳跃(jump in),出现在c和d所指的位置上。可能,整合在#4491染色体上的外源p53基因有两组,一组是稳定整合的,传代时,可以被传递到所有子代上;另一组是非稳定整合的,由于一些未知因素,在传递过程中被扩增、并发生了跳跃现象。也许,特定位点上转基因的拷贝数有一个限量,适量则稳定;反之、则不稳定。
出处 《Developmental and Reproductive Biology》 1998年第1期11-16,共6页 发育与生殖生物学报(英文版)
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