摘要
用抑制性差减杂交结合SMART cDNA合成和RACE-PCR技术的综合方法,从鱼类卵母细胞卵黄形成后期差减文库中克隆到一个新的含WD结构域蛋白的基因.该基因CDNA全长为1870 bp,可读框长990 bp,编码的蛋白质由329个氨基酸组成,含有6个WD结构域;5’非编码区长 210 bp,3’非编码区长 670 bp,有脊椎动物典型的ANNATG起始序列和polyA加尾信号AATAAA.由于其编码的蛋白质与STRAP蛋白(serine-threonine kinase receptor-associated protein)有92%的同源性,所以把它称为FSTRAP(fish STRAP).虚拟Northern杂交表明,FSTRAP在卵母细胞的卵黄形成后期表达,而在卵黄形成前期(I时相卵母细胞)不表达.各种组织的RT-PCR显示,FSTRAP在脑、心、肾、肌肉、卵巢、脾和精巢有转录,而在肝脏中未见扩增带.不同发育时相卵母细胞的RT-PCR表明,FSTRAP在第Ⅱ—Ⅴ时相都有转录.Western杂交也显示FSTRAP在除肝组织外的多种组织中都表达,与RT-PCR结果相同,FSTRAP在卵黄形成前期几乎不表达,从第Ⅱ?
出处
《中国科学(C辑)》
CSCD
北大核心
2001年第4期343-352,共10页
Science in China(Series C)
基金
国家自然科学基金(批准号:30070402)
国家重点基础研究发展规划批准号:G1999053908)
淡水生态与生物技术国