摘要
用抑制性差减杂交结合ＳＭＡＲＴ ｃＤＮＡ合成和ＲＡＣＥ－ＰＣＲ技术的综合方法，从鱼类卵母细胞卵黄形成后期差减文库中克隆到一个新的含ＷＤ结构域蛋白的基因．该基因ＣＤＮＡ全长为１８７０ ｂｐ，可读框长９９０ ｂｐ，编码的蛋白质由３２９个氨基酸组成，含有６个ＷＤ结构域；５’非编码区长 ２１０ ｂｐ，３’非编码区长 ６７０ ｂｐ，有脊椎动物典型的ＡＮＮＡＴＧ起始序列和ｐｏｌｙＡ加尾信号ＡＡＴＡＡＡ．由于其编码的蛋白质与ＳＴＲＡＰ蛋白（ｓｅｒｉｎｅ－ｔｈｒｅｏｎｉｎｅ ｋｉｎａｓｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｐｒｏｔｅｉｎ）有９２％的同源性，所以把它称为ＦＳＴＲＡＰ（ｆｉｓｈ ＳＴＲＡＰ）．虚拟Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交表明，ＦＳＴＲＡＰ在卵母细胞的卵黄形成后期表达，而在卵黄形成前期（Ｉ时相卵母细胞）不表达．各种组织的ＲＴ－ＰＣＲ显示，ＦＳＴＲＡＰ在脑、心、肾、肌肉、卵巢、脾和精巢有转录，而在肝脏中未见扩增带．不同发育时相卵母细胞的ＲＴ－ＰＣＲ表明，ＦＳＴＲＡＰ在第Ⅱ—Ⅴ时相都有转录．Ｗｅｓｔｅｒｎ杂交也显示ＦＳＴＲＡＰ在除肝组织外的多种组织中都表达，与ＲＴ－ＰＣＲ结果相同，ＦＳＴＲＡＰ在卵黄形成前期几乎不表达，从第Ⅱ?
出处
《中国科学（C辑）》
CSCD
北大核心
2001年第4期343-352,共10页
Science in China(Series C)
基金
国家自然科学基金(批准号:30070402)
国家重点基础研究发展规划批准号:G1999053908)
淡水生态与生物技术国
