摘要
利用ＡｃＭＮＰＶ穿梭载体Ｂａｃ－ｔｏ－Ｂａｃ系统构建了分别由杆状病毒极早期基因ｉｅｌ启动子和极晚期基因ｐｈ启动子控制的ＡｃＭＮＰＶ组织蛋白酶基因ｖ－ｃａｔｈ表达的两种双拷贝重组杆状病毒．用这两种重组病毒感染细胞和幼虫，研究了不同时相ｖ－ｃａｔｈ基因的表达及细胞和幼虫死亡的机理．ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ分析结果表明：在感染 Ｓｆ９细胞 １２ ｈ后（１２ ｈ ｐｉ），重组病毒 ｄｃｉＡｃＭＮＰＶ的晚期基因 ｖ－ｃａｔｈ在早期基因ｉｅｌ启动子驱动下得到表达．到 ４８ ｈ ｐｉ，重组病毒 ｄｃｄＡｃＭＮＰＶ中 ｖ－ｃａｔｈ基因在晚期和极晚期ｐｈ启动子驱动下高水平表达．阴性对照ｖ－ｃａｔｈ缺陷型病毒（ｎｃＡｃＭＮＰＶ）则没有Ｖ－ＣＡＴＨ蛋白表达．毒力实验表明它们的杀虫活性大小依次为 ｄｃｄＡＣＭＮＰＶ＞ｄｃｉＡｃＭＮＰＶ＞野生型 ＡｃＭＮＰＶ＞ｎｃＡｃＭＮＰＶ．根据双拷贝重组病毒的毒力和幼虫的死亡特征，ＡｃＭＮＰＶ的ｖ－ｃａｔｈ基因是一个毒力辅助因子和与虫体液化死亡有关的基因．所构建的重组病毒ｄｃｄＡｃＭＮＰＶ 由于是通过改变病毒自身基因的表达时相和拷贝数而提高了杀虫效率，因而不存在田间释放时的安全性隐患，有望成为?
出处
《科学通报》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2001年第15期1288-1294,共7页
Chinese Science Bulletin
基金
为国家自然科学基金(批准号:39870041)
湖北省自然科学基金(批准号:971048)资助项目.
