人胚胎神经干细胞的体外培养

目的:从人胚胎皮层分离神经干细胞,寻找其在体外培养的适合条件.方法:使用具有丝裂原作用的多种细胞生长因子,结合无血清细胞培养技术,从人胚胎皮层分离具有增殖能力的细胞群,在连续传代过程中,验证其自我更新能力和多分化潜能,免疫荧光染色检测Nestin抗原和分化后特异性成熟神经细胞抗原的表达,并且流式细胞仪检测神经干细胞分化结果.结果:协同使用bFGF和EGF从人胚胎皮层分离的细胞群,具有自我更新能力和多分化潜能,表达胚胎早期细胞抗原Nestin,加入LIF后细胞增殖速度加快,分化为神经元的比例增高,而单独采用bFGF、EGF或LIF培养的细胞迅速衰退,仅能培养3 5代.结论:协同使用丝裂原生长因子从人胚胎皮层分离的细胞是中枢神经系统的干细胞;bFGF、EGF和LIF协同使用是体外培养神经干细胞的较佳条件.