hTNFA-hPgnK5融合蛋白的原核表达及测定

Expression and characterization of hTNFA-hPgnK5 fusion protein in prokaryotic system

目的 获得 h TNFα- h Pgn K5融合蛋白基因 ,在原核细胞中表达融合蛋白 ,探索其活性 .方法 PCR法改造h TNFα基因 ,消除其终止密码子 ,构建 h TNFα- h Pgn K5融合蛋白基因 .在大肠杆菌 DH5α中表达该融合蛋白 ,测定其体外抑制肿瘤细胞或血管内皮细胞增殖的活性 .结果 h TNFα基因经 PCR法改造 ,去除了终止密码子 ,并在 3 端引入 Bam HI位点 .h TNFα- h Pgn K5融合蛋白基因构建完成 ,并在原核系统中获得表达 ,免疫印迹反应表明该融合蛋白具有 h Pgn K5免疫活性 .体外实验表明该融合蛋白可抑制肿瘤细胞和血管内皮细胞的增殖 .结论 h Pgn K5蛋白可与 h TNFα一起表达 。

AIM To obtain the gene of hTNFα hPgnK5 fusion protein, express the fusion protein in prokaryotic system and research its characterization. METHODS hTNFα gene was reformed by PCR and its termination codon eliminated, the hTNFα hPgnK5 fusion protein gene then constructed was and the fusion protein in prokaryotic system expressed, fi