期刊文献+

微型腺病毒载体的扩增和纯化研究

Preliminary Study of Mini-Adenovirus System
原文传递
导出
摘要 微型腺病毒(mAd)是去除所有编码基因,仅保留两侧反向末端重复序列(ITR)及包装信号(Ψ)的新型腺病毒载体.它具有包装容量大,免疫原性小等优点.在大量扩增时,需与缺失E1区及包装信号的辅助腺病毒共转染入包装细胞(293细胞)内,CsCl超离心纯化,将二者分开.再通过琼脂糖覆盖挑斑、在包装细胞内大量扩增、CsCl超离心纯化等步骤,最终得到较为纯净的mAd.但因mAd结构不稳定,易与辅助病毒发生同源重组,在CsCl超离心时不能完全与辅助病毒分开,导致外源基因表达逐步下降. Mini-Adenovirus (mAd) is a novel adenoviral vector that contains only the viral inverted terminal repeat se- quences (ITR), packaging signal and cis-acting elements required for viral DNA replication and packaging. MAd vec- tor has larger capacity and lower immunogenicity, which showed its proprietary prospect in the field of gene therapy. For amplification of mAd vector, the cells must be co-transfected with mAd and helper Ad that deleted El region and packaging signal for packaging cells. Through plaque assay, amplification and propagation , the density of purified mAd was 2.3× 10^(11) mL^(-1) However, mAd genome was found unstable and with 1% contamination of helper Ad. The am- plification and purification of mAd were discussed.
出处 《复旦学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期525-529,共5页 Journal of Fudan University:Natural Science
基金 国家"863"项目(863-Z20-02-01) 国家自然科学基金(39880019) 国家教育部优秀青年教师基金 教育部
关键词 微型腺病毒 扩增 纯化 病毒载体 包装容量 免疫原性 基因表达 Mini-Adenovirus amplification purification
  • 相关文献

参考文献6

  • 1候云德.分子病毒学[M].北京:学苑出版社,1990.637-9.
  • 2Morsy M A,Proc Natl Acad Sci USA,1998年,95卷,7866页
  • 3Alemany R,J Virol Methods,1997年,6S卷,147页
  • 4Lieber A,Nature Biotechnol,1997年,15卷,1383页
  • 5Parks R J,Proc Natl Acad Sci USA,1996年,93卷,13565页
  • 6候云德,分子病毒学,1990年,151页

共引文献6

相关作者

内容加载中请稍等...

相关机构

内容加载中请稍等...

相关主题

内容加载中请稍等...

浏览历史

内容加载中请稍等...
;
使用帮助 返回顶部