摘要
为了检测反义转染引起的细胞着丝粒蛋白CENP-B表达的变化情况,用原核表达的融合蛋白GST-CENP-B免疫Balb/c 小鼠,制得抗CENP-B的鼠抗血清(MaCenpB).转染了含有反义CENP-B表达载体pBI-EGFP-as-CenpB的HeLa-Tet-off细胞(HaCb),用Northern blot和Western blot研究了转染后细胞内源CENP-B基因表达的抑制情况.生长曲线表明,反义CENP-B抑制HeLa(Tet-off)细胞增殖,使倍增时间延长了32.8h.流式细胞光度术分析表明,较之HeLa(Tet-off)细胞,HaCb的G1期比例增加(△G1=9%),S期比例减少(△S=11%).同时,有丝分裂指数(MI)大大降低;间接免疫荧光分析表明,HaCb的着丝粒组装受到抑制.这说明,CENP-B的正常表达对于细胞的增殖是必要的.
出处
《科学通报》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2001年第22期1872-1876,共5页
Chinese Science Bulletin
基金
本工作为国家重点基础研究发展规划(批准号:G1999053901)
国家自然科学基金(批准号:39430080
39970361)资助项目