备用背根猫脊髓源性神经营养活性物质的初步分离及生物活性检测

本研究组对脊髓可塑性研究已证实，切除猫部分背根后，保留的背根（备用报）纤维可则侧支出芽代偿被切断的传入纤维，并与其靶区（背角）重建突触联系。用电泳和体外培养等方法亦发现备用背根猫去传入侧脊髓背角组织提取液中一些蛋白质的含量发生了变化，而且其促神经突起生长的作用增强。在以上研究的基础上，我们采用凝胶过滤层析方法，分离提取液中对神经突起生长有促进作用的相关蛋白质。实验采用成年雄性家猫30只，切除一侧T10～L1，L3～L5，L7～S2背根节，保留L2和L5背极为备用背根。术后五天取手术侧和非手术侧T9～S3节段脊髓背角组织，分别匀浆、离心后，所得上清液即为提取液。提取液经SephadexG－200凝胶过滤层析后，获得三个主峰，分别收集手术侧和非手术侧三个峰值处的洗脱液，透析、冻干，用再改良的悬滴培养法进行生物活性检测。结果发现：手术侧背角提取液中第二峰值洗脱液促鸡胚背根节神经突起生长的作用明显张于非手术侧者（Pwto．01），在加入量为50ug／ml时，促神经突起生长作用最强。本研究结果为进一步分离纯化该神经营养活性物质奠定了基础。