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小鼠H—2D^d基因的克隆及其逆转录病毒表达载体的构建

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摘要 目的:构建BALB/c小鼠H-2D^d基因的逆转录病毒表达载体。方法:采用反转录PCR从BALB/c小鼠脾细胞基因组中,扩增H-2D^d的编码基因,插入克隆载体pGEM-T中。经EcoR I和Xho I双酶切后,亚克隆法于逆转录病毒载体pMSCV的相应酶切位点,构建pMSCV-H2D^d重组表达质粒,并经双酶切和序列测定鉴定。结果:用EcoR I和Xho I双酶切鉴定证实,克隆基因正确插入载体pMSCV。克隆H-2D^d的编码基因经序列测定证实,与文献报道完全一致。结论:成功构建小鼠H-2D^d编码基因的逆转录病毒载体,为进一步研究MHC分子在移植免疫中的作用及临床移植的基因治疗应用奠定了基础。
出处 《中华临床医药杂志(北京)》 CAS 2002年第3期4-5,共2页
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