支原体科病原体分子检测方法学研究

支原体科微生物感染不仅可致人体炎症及并发症(不孕不育、妊娠不良结局等),近年并发现支原体是HIV感染的协同因子。支原体体外培养困难,且不同的支原体感染可有相同的疾病谱。为此我们建立了以外套通用扩增、内套种特异扩增的9种支原体套式聚合酶链反应(nPCR)检测方法,为满足进一步确认和变异株研究并建立了nPCR产物全自动DNA测序方法。方法学考核结果为本nPCR检测技术为支原体种特异、灵敏度可达1fg支原体DNA(约一个支原体菌体)。nPCR检测全流程仅需5小时。