射频毁损后肝脏病理形态变化的动态观察

目的 通过对射频频毁损后正常兔肝组织的超声声像图，病理形态及超微结构改变的动态观察，探讨射频毁损声像图特征性改变的病理学基础及射频毁损的机制，为临床应用射频治疗肿瘤提供实验依据和理论基础。方法 成年新西兰白兔26只，随机取25只分成5组，分别对射频毁损即刻组，1周组，2周组，3周组，4周组。在超声引导下用输出功率150W，设定温度100℃的射频治疗仪对兔肝脏靶区进行10min射频毁损。分别于射频毁损即刻1，2，3，4周将兔子处死，同时进行毁损区超声声像图，肉眼观察记录并取材固定行光镜，电镜观察。剩余1只于射频后即刻，15min,30min,1h,2h,4h6个时间点用自动活检枪取射频毁损区和周边区组织送电镜观察。结果 （1）超声声像图改变：即刻组毁损区表现为强回声区，1周后毁损区呈弱不等回声，并出现小液暗区，周边可见不连续薄回声环。2－4周后毁损区渐向低回声转变，周边出现逐渐增厚的连续强回声环。（2）大体标本见即刻组毁损区呈灰白色，至1周后周边出现少许菲薄的纤维带，2－4周后毁损区组织逐渐变软，周边纤维带渐增厚。（3）光镜下改变：即刻组毁损区中心见肝细胞高度固缩，结构模糊不清，部分肝细胞泡化消失，肝小叶结构塌陷。而旁中心区肝小叶，肝细胞索结构尚完整。1周组中心区见部分坏死的肝细胞开始溶解液化。2－4周组溶解液化区扩大。毁损交界区即刻组见肝细胞，肝索排列紊乱，肝窦出血。1周组内芽带出现，并有多少不等的炎症细胞浸润，以中性粒，淋巴，单核和浆细胞为主。2－4周组纤维性包膜形成，出现泡沫细胞。旁交界区肝组织由即刻时的轻度固缩到1周后肿胀明显，2－4周后逐渐恢复。（4）电镜下改变；射频毁损区即刻见肝细胞，内皮细胞，贮脂细胞坏死,仅存组织，细胞轮廓，质膜崩解，细胞器减少或消失，代之以颗粒状中等电子密度致密物。15min后肝细胞内致密颗粒开始溶解而减少，30min可见到少许坏死的肝细胞轮廓开始模糊不清，有的坏死的肝细胞细胞质出现局灶性空白区。到4h多数坏死细胞的细胞质和核区内出现空白区。射频后1－4周多数肝组织细胞轮廓模糊不清。至4周时，肝细胞及周围其他细胞混合成一片散在细小颗粒物区，组织结构轮廓消失。射频毁损交界区早期各时间点变化无差异，可见到部分肝细胞线粒体水肿和部分内皮细胞凋亡。1周时，见成堆成层平行排列的成纤维细胞及胶原纤维，并可肌纤维母细胞伸入坏死肝组织内。4周时，包膜内胶原纤维层明显增厚。内皮细胞凋亡在1周时较多见，随着时间推移越来越少见，但于4周仍可见少量凋亡的内皮细胞。结论 （1）射频毁损肝组织表现为局灶性的凝固性坏死的病理改变，属不可逆的变化。（2）射频毁损区的超声声像图改变与坏死病理变化是相互对应的，故B超可作为判断射频毁损效果的一种手段。（3）实验过程中观察到射频毁损1周时毁损区周边肝组织开始出现与免疫反应有关的炎症细胞如浆细胞及淋巴细胞浸润，该现象是否说明射频毁损能激发机体的局部免疫和全身免疫反应有待于进一步观察和研究。