摘要
将NDV弱毒株长春株表面糖蛋白HNcc基因和强毒株四平株HNsp分别插入到核酸疫苗质粒pIRES1中 ,置于CMV启动子的调控之下 ,构建成核酸疫苗表达质粒pIRHNC 及pIRHNS。经酶切鉴定插入正确后 ,用脂质体法转染BHK细胞 ,并于转染后 2 4h、4 8h、72h和 96h收获细胞 ,同时用G4 18进行筛选 ,待筛选细胞长成单层后收获一次细胞。取细胞裂解液检测其血凝活性。通过血凝试验表明两核酸疫苗质粒中的HN蛋白基因均获得表达并具有类似与天然蛋白的蛋白活性 ,且G4 18筛选后表达量高于筛选前的表达量 ,HNC活性略高于HNS。
Two nucleic acid vaccine plasmids, pIRHNc and pIRHNs were constructed by inserting HN of NDV an avirulent Changchun strain or a virulent Siping strain into multiclonig site of pIRES1neo. The cells were harvested at 24h?48h?72h ?96h and posttransfection(G418+),The expression of HN in BHK cells was confirmed by hemagglutination test .The results showed that the hemagglutination titer of pIRHN c higher than pIRHN s.
出处
《塔里木农垦大学学报》
2002年第2期1-4,8,共5页
Journal of Tarim University of Agricultural Reclamation
基金
国家"973"资助项目编号 :G1990 1190 2 1
