当归试管苗ISSR-PCR体系建立及遗传稳定性研究

目的:建立当归试管苗ISSR-PCR反应体系,在此基础上对当归试管苗进行遗传稳定性研究。方法:试剂盒法提取当归试管苗DNA,采用正交试验筛选最佳ISSR-PCR反应条件,利用已建立的ISSR-PCR反应体系分析当归试管苗的遗传稳定性。结果:建立了当归试管苗ISSR-PCR反应的最佳体系(25μL):dNTPs 1.20μL、Mg2+0.9μL、引物1.0μL、模板DNA 1.70μL、Taq酶0.60μL、10×PCR Buffer 2.5μL、ddH2O 17.1μL。结果表明,当归试管苗的DNA条带变异率为0.662%。结论:建立的ISSR-PCR技术体系可用于当归种质资源鉴定,当归试管苗具有很高的遗传稳定性,可作为种苗在生产上使用。