程序性死亡因子配体1在脂肪间充质干细胞抑制大鼠肝移植术后排斥反应中的作用

The role of programmed death ligand 1 in adipose-derived mesenchymal stem cells-induced inhibition of rejection following liver transplantation and possible mechanisms

目的 探讨脂肪间充质干细胞（ADMSCs）对大鼠肝移植术后排斥反应的影响及其机制.方法 分离培养SD大鼠ADMSCs,构建RNA干扰慢病毒载体转染ADMSCs阻断程序性死亡因子配体1（PD-L1）.以SD为供体、Wistar大鼠为受体建立肝移植模型,随机分为A（空白组）、B（对照组）、C（实验组）3组,分别以生理盐水2 ml/ADMSCs（1×107个）/慢病毒转染后ADMSCs（1×10 7个）处理,比较3组大鼠肝移植术后7d肝功能、白细胞介素（IL）-2和IL-10、肝脏病理改变及干细胞凋亡、肝脏组织B细胞淋巴瘤/白血病-2（bcl-2）和bcl相关X蛋白（bax）表达差异.结果 A组血清谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、总胆红素（TBIL）、IL-2和IL-10水平分别为（188.9±30.8）U/L、（177.1 ±27.9） U/L、（53.8±14.1）μmol/L、（296.32±56.25） ng/L、（74.92±10.98） ng/L;B组为（114.2±22.7） U/L、（134.8±18.1） U/L、（27.7±5.2）μmol/L、（186.36±17.84） ng/L、（194.56±36.87） ng/L;C组为（160.5 ±28.3） U/L、（155.6±25.6） U/L、（41.2±10.3） μmol/L、（250.95±42.68） ng/L、（125.52 ±26.34） ng/L,3组间差异有统计学意义（P＜0.05）.原位缺口末端标记法（TUNEL）检测A、B、C组的凋亡指数分别为35.86 ±5.92、12.39±2.23和28.47 ±4.32,3组间差异有统计学意义（P＜0.05）.B组大鼠肝移植模型术后bcl-2表达显著高于A组和C组,C组bcl-2表达低于A组;A组bax表达高于A组和C组,C组bax表达高于A组.结论 ADMSCs可显著降低肝移植术后排斥反应,PD-L1通路可能在其抑制排除反应中起重要作用.

Objective The present study was designed to investigate the role of Adipose-derived mesenchymal stem cells （ADMSCs） in hver transplantation and possible mechanisms.Methods Thirty six rats （A,B and C groups） were infused normal saline,ADMSCs,or programmed death ligand 1 （PD-L1）-knockdown ADMSCs,then received orthotopic liver transplantation.Seven days following transplantation,liver function,cytokines,and apoptosis were examined.Results Liver function results showed that the levels of alanine transaminase （ALT）,aspartate aminotransferase （AST）,total bilirubin （TBIL）,interleukin （IL）-2 and IL-10 for those groups were：（188.9 ±30.8） U/L,（177.1 ±27.9） U/L,（53.8 ± 14.1） μmol/L,（296.32 ± 56.25） ng/L,（74.92 ± 10.98） ng/L; （114.2 ± 22.7） U/L,（134.8 ± 18.1） U/L,（27.7±5.2） μmol/L,（186.36 ±17.84） ng/L,（194.56 ±36.87） ng/L; （160.5 ± 28.3） U/L,（155.6±25.6） U/L,（41.2±10.3） μmol/L,（250.95±42.68） ng/L,（125.52 ± 26.34） ng/L.ADMSCs infusion significantly suppressed liver cell apoptosis,increased bcl-2 level,and decreased bax level.These apoptosis-related changes were reduced by PD-L1 knockdown.Conclusion Together these,our results demonstrated the protective role of ADMSCs in liver transplantation rejection,and suggest that PD-L1 underlie the mechanism.