猪繁殖与呼吸综合征病毒与猪流感病毒二重RT-PCR检测方法的建立

为建立可同时检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)与猪流感病毒(SIV)二重RT-PCR方法,研究根据GenBank登录的相关病毒基因序列,选择保守区域设计引物,经过反应条件的优化,建立了可同时检测以上2种病毒的RT-PCR诊断方法,扩增的目的片段长度分别为364 bp(PRRSV)和981 bp(SIV)。通过实验证明该方法具有良好的特异性和较高的敏感性,对PRRSV和SIV的核酸检测最低浓度分别为3.2×10-3 ng和2.7×10-3 ng。应用该方法对32份临床样品进行检测发现,PRRSV阳性率为43.8%,SIV阳性率为31.3%,二重感染率为9.4%。该方法的成功建立为快速高效地检测以上2种病毒提供了有力手段。