摘要
目的建立SD大鼠胎鼠海马神经元的分离、培养方法,观察体外培养过程中神经元的形态学变化,为进行海马神经元的体外研究提供技术支持。方法分离18天胎龄的SD大鼠胎鼠的海马区,经机械吹打,台盼蓝计数后,采用无血清培养基接种于24孔板。每天在显微镜下进行神经元的形态观察;第7天用免疫组化染色法检测微管相关蛋白2(MAP2)的表达,进行神经元鉴定及纯度计算。结果机械分离18天胎龄的SD大鼠胎鼠海马得到细胞,经台盼蓝染色,细胞存活率在98%以上。神经元在体外生长良好,培养第7.10天时胞体最为丰满,神经元突起间互相接触形成致密的网络,28天时细胞数量明显减少,可见大量变性的神经元细胞碎片。MAP2鉴定结果显示,培养7天的海马神经元纯度为92.8%。结论此培养方法获得的海马神经元纯度高、体外存活时间长,具有简便易行,结果稳定的优点,可作为神经元体外培养的良好模型。
出处
《国际医药卫生导报》
2014年第17期2617-2620,共4页
International Medicine and Health Guidance News
基金
广东省科技计划项目(20118061200001)