北美型猪繁殖与呼吸综合征病毒M蛋白新线性抗原表位的特性研究

由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF6基因编码的M蛋白被认为是PRRSV中最保守的蛋白之一。近几十年来,高特异性单克隆抗体(Mabs)被用来对多种疾病提供可靠检测。本试验制备和鉴定了2个针对PRRSV M蛋白线性表位的不同Mabs。免疫荧光试验和Western blotting结果表明,2个Mabs均表现出对原始PRRSV病毒粒子和重组M蛋白的结合能力。利用一系列M蛋白截短表达形成的相互重叠片段来定位每个Mab的靶表位,然后通过一组表达的多肽扫描精确表位。利用Mabs 1C8和3F7鉴定了2个表位的多肽序列,分别为3SSLD6和155VLGGRKAVK163,这2个表位首次被精确定位,且前者是新鉴定出来的M蛋白表位。Mab表位序列的比对结果显示,M蛋白的这2个表位在北美型PRRSV毒株间高度保守。这2个Mabs及其确定的表位,对诊断和检测工具的研发具有重要意义,如免疫荧光试验、ELISA和Western blotting。