应用ICSI-Tr技术生产转Fat-1基因水牛胚胎的初步研究

肉质的改善是水牛未来育种的重要方向,为提高水牛肉中n-3多不饱和脂肪酸的含量,本研究探讨了应用ICSI介导技术(ICSI-Tr)生产转Fat-1基因水牛胚胎的可行性。将水牛组织性启动子PGK1、目的基因Fat-1和标记基因EGFP表达盒依次连接,成功构建获得转基因载体pPGK1-FAT1-CMV-EGFP。随后以酶切线性化的转基因载体质粒DNA为素材,探讨了5、10、25、50μg/m L和70μg/mL等5个不同浓度梯度对pPGK1-FAT1-CMVEGFP转基因效果的影响。结果表明:在不同浓度DNA试验组应用ICSI-Tr介导技术均能获得表达EGFP的转基因水牛胚胎。其中,25μg/m L为适宜浓度。