高迁移率族蛋白B1对人原代支气管上皮细胞血管内皮生长因子表达和释放的影响

目的探讨高迁移率族蛋白B1(HMGB1)对人原代支气管上皮细胞(PBEC)血管内皮生长因子(VEGF)表达和释放的影响及可能调控机制。方法 (1)按浓度依赖性分组;给予HMGB1 0、100、500、2 000μg/L刺激细胞;(2)时间依赖性分组:设置空白对照,HMGB1 2 000μg/L刺激PBEC时间为6、12、24 h。四唑盐法检测上述方法干预PBEC后细胞活力;实时荧光定量PCR检测PBEC VEGF mRNA表达水平变化,双抗体夹心酶联免疫吸附实验法检测细胞培养上清液中VEGF的浓度。拮抗高级糖基化终产物受体(RAGE)观察其对HMGB1诱导表达和释放VEGF的影响。结果 HMGB1在不影响细胞活力的情况下,(1)HMGB1与PBEC VEGF的表达和分泌水平存在剂量-效应关系,HMGB1(500、2 000μg/L)浓度组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。(2)随HMGB1 2 000μg/L刺激时间延长,VEGF的表达和分泌逐渐升高,呈时间依赖性,且12、24 h组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。(3)HMGB1 2 000μg/L刺激PBEC 24 h显著增加VEGF表达和释放,拮抗RAGE后显著抑制了HMGB1诱导的VEGF表达和释放。结论 HMGB1通过受体RAGE途径的增加PBEC VEGF的表达和释放,从而参与慢性气道炎症的发生和发展,其相关分子机制仍需要进一步探讨。