十六烷基三甲基溴化铵制片法检测人周围血淋巴细胞微核

Production method with cetyl trimethyl ammonium bromide for detection of human peripheral blood lymphocyte micronucleus

目的建立以十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）为主要溶血剂的人周围血淋巴细胞微核制片法。方法采集放射工作人员静脉血样本48份，用CTAB、氯化钱、乙二胺四乙酸二钾和碳酸氢钾配成不同浓度的混合液，探索其对红细胞的溶解情况和对淋巴细胞胞浆的影响，确定红细胞刚好溶解而淋巴细胞胞浆基本保持完整时的浓度和最佳溶血时间，然后加固定液固定，离心制片观察结果，并与明胶浓集法和低渗溶血法进行比较。结果CTAB浓度为0．012mmol/L、溶血时间为15～20s时效果最佳。本方法制片周围血淋巴细胞的细胞完整率低于明胶浓集法[89．15％（85．48，92．00）％w93．00％（89．48，94．70）％，P〈0．05]，高于低渗溶血法[89．15％（85．48，92．00）％w82．15％（78．18，86．60）％，P〈0．05]；本方法淋巴细胞微核率分别与明胶浓集法和低渗溶血法比较，差异均无统计学意义[2.200％（1．00，3．00）‰ vs 2．00‰（1．00，3．00）‰，2．00‰（1．00，3．00）‰ vs 1．00％0（1．00，2．00）‰，P〉0．05]；本方法涂片中沉淀物为阳性所占比例低于低渗溶血法[12．5％（5／48）vs54．1％（26／48），P〈0．01]。结论所建方法制片重复操作结果稳定，胞浆完整性好，视野清晰，可代替常规低渗制片法，用于人周围血淋巴细胞微核检查制片。