体外抗AD药物筛选中MTT、Edu和RTCA法的比较研究

目的比较MTT、Edu和RTCA三种检测细胞增殖方法的重复性、稳定性和灵敏性,探讨使用三种方法进行抗AD药物体外筛选的适应性。方法采用谷氨酸诱导的PC12细胞损伤模型作为阿尔茨海默病(Alzheimer's Disease,AD)的体外模型,运用以上3种方法观察补肾益智方提取部位对谷氨酸导致的PC12细胞损伤的增殖变化。结果 MTT法检测药物浓度在100μg/ml时细胞活力和增殖达到47%;Edu法检测药物浓度在25μg/ml时细胞活力和增殖达到36.7%;RTCA法检测药物浓度在25μg/ml比在100μg/m L和6.25μg/ml浓度时细胞活力和增殖能力高,且在不同的时间段增殖率有所不同。结论 MTT法简单、快速、经济,结果与细胞中线粒体酶活性有关,间接反映细胞的增殖状态;Ed U标记技术灵敏、客观,特异性标记分裂期细胞,直接反映细胞的增殖状态;RTCA法方便、宏观、可信,通过细胞与电极板的相互作用,直观反应细胞的增殖趋势。