猪圆环病毒2型SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法的建立

为了建立猪圆环病毒2型（PCV2）SYBRGreenⅠ荧光定量PCR检测方法，采用PCR扩增PCV2ORF2基因242bp片段，并克隆入pMD18-T载体中，以纯化的重组质粒为模板作荧光定量PCR扩增．建立了PCV2荧光定量PCR检测方法，该方法检测灵敏度可达1．2×10^1拷贝／μL，与猪圆环病毒1型（PCV1）、猪瘟病毒（CSFV）、猪蓝耳病病毒（PRRSV）、猪细小病毒（PPV）、猪伪狂犬病病毒（PRV）、乙型脑炎病毒（JEV）核酸均不发生扩增反应，具有很好的特异性和重复性。结果表明：建立的PCV2实时荧光定量PCR检测方法具有特异，敏感、快速、定量、重复性好等优点，可用于临床PCV2的检测。