槐猪精液中N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶功能基团的研究

为了研究酶活性中心功能基团的性质,从槐猪精液中提取N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(EC3.2.1.52,简称NAGase)的电泳单一纯酶制剂,试验采用动力学和化学修饰的方法进行研究。结果表明:在37℃条件下,酶活性中心解离常数p Ke值为5.29,解离热焓ΔHo值为30.46 k J/mol,酶活性相关的可解离基团是咪唑基;在特定条件下,通过对酶分子基团的特异性修饰可知,对酶分子链内二硫键、巯基及吲哚基的修饰会使酶的活性显著下降。说明这些氨基酸残基也是该酶的功能基团,而ε-氨基可能与维系酶分子构象有关,胍基则被修饰后对酶活性没有影响,不是此酶的功能基团。