糖基化终末产物对肠道L细胞株胰高血糖素肽-1分泌水平及L细胞凋亡的影响

目的探讨糖尿病糖基化终末产物(AGEs)对肠道L细胞株GLUTag细胞凋亡及胰高血糖素肽-1(GLP-1)分泌水平的影响。方法 200μg/m L AGEs分别作用GLUTag细胞0、12、24、48 h,采用AnnexinⅤ-FITC/PI染色检测细胞凋亡率。利用ELISA检测GLUTag细胞GLP-1分泌水平。实验分5组:空白对照组不加入干预因素,仅培养于DMEM低糖培养基中;BSA对照组培养于加入BSA的DMEM低糖培养基中;AGEs 100μg/m L组培养于100μg/m L AGEs浓度的DMEM低糖培养基中;AGEs 200μg/m L组培养于200μg/m L AGEs浓度的DMEM低糖培养基中;AGEs 300μg/m L组培养于300μg/m L AGEs浓度的DMEM低糖培养基中,分别作用细胞24h。采用AnnexinⅤ-FITC/PI染色检测细胞凋亡率。利用ELISA检测GLUTag细胞GLP-1分泌水平。结果各组细胞经药物干预24 h后,100、200、300μg/m L AGEs组的细胞凋亡率均显著高于空白对照组和BSA对照组(P=0.000);且300μg/m L AGEs组的细胞凋亡率最高(P<0.05),100、200、300μg/m L AGEs组的细胞分泌GLP-1浓度显著低于空白对照组和BSA对照组(P=0.000),且300μg/m L AGEs组最低(P<0.05)。200μg/m L AGEs作用12、24、48 h后的细胞凋亡率显著高于BSA对照组(P=0.000),且作用48 h组凋亡率最高(P=0.000);200μg/m L AGEs作用12、24、48 h后的细胞分泌GLP-1浓度均显著低于BSA对照组(P=0.000);且作用48 h最低(P<0.05)。结论肠道L细胞株GLUTag细胞的凋亡在相同作用时间下随着AGEs的浓度升高而增多,且在相同剂量下随着AGEs的作用时间延长而增多。AGEs可呈剂量、时间依赖性诱导肠道L细胞凋亡,并显著降低L细胞分泌GLP-1的能力。