人参皂苷Rb1对低氧加无血清培养诱导的大鼠骨髓间充质干细胞凋亡的影响

目的探讨人参皂苷Rb1对低氧/无血清培养诱导的大鼠骨髓间充质干细胞（r BMSCs）凋亡的作用。方法 MTT法检测浓度范围在0.1～1 000μg/L的人参皂苷Rb1对r BMSCs增殖的影响。将细胞培养液更换为低氧预处理的不含血清的培养液,置1%O2、5%CO2、37℃三气培养箱中培养24 h建立细胞凋亡实验模型。实验分为C组、H/SD组和Rb1-L组、Rb1-M组、Rb1-H组。C组和H/SD组分别为常氧和低氧血清剥夺处理,不加Rb1,Rb1-L组、Rb-M组、Rb1-H组在H/SD处理的同时,培养液中依次加10、100、1 000μg/L Rb1。Annexin V-FITC/PI染色,荧光显微镜下观察细胞凋亡情况,罗丹明123＋Hoechst 33342染色观察线粒体膜电位改变,分光光度法检测Caspase-3酶活力,qRT-PCR检测Bcl-2家族基因表达水平。结果 Rb1浓度范围在10～1 000μg/L有促细胞增殖作用。与C组比较,H/SD组细胞凋亡率、Caspase-3酶活性均升高,线粒体膜电位明显降低,Bcl-2 mRNA表达水平下降,Bax mRNA表达水平升高,差异有统计学意义（P〈0.01）,Bcl-2/Bax比值为0.32。与H/SD组比较,Rb1-L、Rb1-M和Rb1-H组细胞凋亡率及Caspase-3酶活力均降低,线粒体膜电位有不同程度恢复,Bcl-2 mRNA表达水平升高,Bax mRNA表达水平降低,Bcl-2/Bax比值均升高,差异有统计学意义（P〈0.05,P〈0.01）。各项指标在Rb1各组组间差异无统计学意义（P〉0.05）,但反应强度H组〉M组〉L组。结论人参皂苷Rb1对低氧加无血清培养诱导的r BMSCs凋亡有保护作用,其浓度以1 mg/L为最佳。