摘要
通过利用抗体和抗原的特异性结合的原理,通过化学反应,使组织内的特定物质可视化,借助显微镜(包括荧光显微镜、激光显微镜,光学显微镜、电子显微镜)对其进行定位、定性及定量的研究方法称为免疫组织化学法(Immunohistochemistry,免疫组化)。基本原理是通过特殊标记(荧光素、酶、金属、同位素)的抗体为中介在细胞、亚细胞水平检测各种抗原物质(如蛋白质、多肽、酶、激素、病原体以及受体等)。免疫组化是广义的名称,免疫电镜可称呼为免疫细胞化学(Imnmocytochemisny)。首先哈弗大学的细菌学教授coons开发了荧光抗体法,虽然应用的是简单的直接法,但开创了免疫组化的新的开端。1960年由日本人中根提出了酶免疫抗体法(Immunoperoxidase method),接着又开发了PAP法,ABC法等间接法。近年来由于荧光显微镜,激光共焦显微镜的出现,在研究领域使用荧光色素的方法也开始普遍引用。另外在临床病理诊断中酶免疫组化的使用率较高,针对目的的不同,使用的免疫组化的方法也各异。为了下面我针对免疫组化实验过程中的固定,抗体,染色的机制浅谈一下自己的经验。
