环介质恒温介导技术快速检测生牛乳中产肠毒素大肠杆菌

为了快速检测生牛乳中产肠毒素大肠杆菌(ETEC),试验根据不耐热肠毒素A亚基与B亚基编码基因,设计4套特异引物,并对反应时间、反应温度、引物与Bst DNA聚合酶浓度进行优化。结果表明:环介质恒温介导技术(LAMP技术)快速检测生牛乳中ETEC的最佳反应条件为引物F3与B316μmol/L,引物FIP与BIP 128μmol/L,0.45μmol/L d NTPs,2 U Bst DNA聚合酶,63℃孵育60 min,本方法的最低检测限为547 cfu/m L。试验建立的LAMP技术可快速、灵敏、准确地检测生牛乳中的ETEC。